ADA Assays

Antikörper gegen Medikamente (Anti-Drug Antibodies, ADA) können insbesondere bei biotechnologisch hergestellten Wirkstoffen wie Wachstumsfaktoren oder therapeutischen Antikörpern zu unerwünschten Nebenwirkungen führen. Bei der erweiterten Prüfung der Immunogenität stehen ADA daher zunehmend im Fokus der Zulassungsbehörden [1-6].

In präklinischen und klinischen Studien wurden bereits durch ADA induzierte, erhebliche Veränderungen der Toxikologie, Pharmakokinetik oder Wirksamkeit von Wirkstoffen beobachtet. Diese reichen von der Herabsetzung der Wirksamkeit, über die Ausprägung von Medikamenten-induzierten (neutralisierenden) Autoantikörpern z.B. gegen EPO [10, 11], FVIII [12] oder Insulin [13], bis hin zu allergischen Reaktionen und anaphylaktischem Schock. Daher ist bei der Entwicklung von biotechnologisch hergestellten Wirkstoffen (inklusive Biosimilars) eine Untersuchung auf ADA angezeigt [7-9].

Unerwünschte immunologische Reaktionen können in Abhängigkeit vom Aufbau, der Herstellungsweise, der Applikationsform oder der Formulierung eines Wirkstoffs sehr unterschiedlich ausfallen, so kann es beispielsweise zur Ausprägung von anti-Fc Antikörpern, anti-idiotypischen Antikörpern oder Antikörpern gegen glykosilierte Antigene kommen. Daher müssen die zum Nachweis und zur Charakterisierung verwendeten Assays für jeden Wirkstoff spezifisch zugeschnitten und optimiert werden.

Nachweis von Anti-Drug Antibodies

Der ADA Nachweis erfolgt in mehreren Schritten:

• Screening Assay („bridging“, direkter oder kompetitiver ELISA; Zytokin-Profil)
• Confirmation Assay (Bestimmung der Spezifizität)
• Characterization Assay (Klasse/Isotypen der Antikörper; neutralisierend ja/nein)

Sofern zusätzlich die Pharmakokinetik des Wirkstoffs vorliegt, können mögliche Änderungen mit dem Auftreten von ADA korreliert werden.

vivo Science bietet Ihnen die Entwicklung, Optimierung und Durchführung der ADA Tests. Gerne adaptieren und validieren wir für Sie auch die in Ihrem Haus bereits (vor-) entwickelten Assays unter GLP-Bedingungen.

Richtlinien

1: GUIDELINE ON THE CLINICAL INVESTIGATION OF THE PHARMACOKINETICS OF THERAPEUTIC PROTEINS (CHMP/EWP/89249/2004)

2: GUIDELINE ON IMMUNOGENICITY ASSESSMENT OF BIOTECHNOLOGY-DERIVED THERAPEUTIC PROTEINS (EMEA/CHMP/BMWP/14327/2006)

3: Guideline on immunogenicity assessment of monoclonal antibodies intended for in vivo clinical use. (EMA/CHMP/BMWP/86289/2010)

4: Guideline on similar biological medicinal products containing monoclonal antibodies (EMA/CHMP/BMWP/403543/2010)

5: ICH Topic S6 . Preclinical Safety Evaluation of Biotechnology-Derived Pharmaceuticals. (CPMP/ICH/302/95)

6: ADDENDUM TO ICH S6: PRECLINICAL SAFETY EVALUATION OF BIOTECHNOLOGY-DERIVED PHARMACEUTICALS, S6(R1), Current Step 2 version Dated October 29 2009

Literatur

7: Biologicals 2011, 39, 100
Taking immunoghenicity assessment of therapeutic proteins to the next level.
Bütel-IC et al.

8: J. Neurol. 2004 Jun;251 Suppl 2:II4-9.
Immunogenicity of recombinant human proteins: causes and consequences.
Schellekens H, Casadevall N.

9: Regul Toxicol Pharmacol. 2009 Jul;54(2):164-82.
Immunogenicity of biologically-derived therapeutics: assessment and interpretation of nonclinical safety studies.
Ponce R, Abad L, Amaravadi L, Gelzleichter T, Gore E, Green J, Gupta S, Herzyk D, Hurst C, Ivens IA, Kawabata T, Maier C, Mounho B, Rup B, Shankar G, Smith H, Thomas P, Wierda D.

10: Transfusion. 2008 Aug;48(8):1754-62..
Epoetin-associated pure red cell aplasia: past, present, and future considerations.
McKoy JM, Stonecash RE, Cournoyer D, Rossert J, Nissenson AR, Raisch DW, Casadevall N, Bennett CL.

11: NEJM 2004 351:14, 1403
Pure Red-Cell Aplasia and Epoetin Therapy
Bennett Cl et a.

12: Blood. 2000 Jun 1;95(11):3435-41
Antibodies to the FVIII light chain that neutralize FVIII procoagulant activity are present in plasma of nonresponder patients with severe hemophilia A and in normal polyclonal human IgG.
Moreau A, Lacroix-Desmazes S, Stieltjes N, Saenko E, Kaveri SV, D’Oiron R, Sultan Y, Scandella D, Kazatchkine MD.

13: Diabetologia 1983 25, 465
Immunogenicity of recombinant DNA human insulin.
Fineberg SE et al

14: Journal of Immunological Methods 333 (2008) 1–9
Recommendations on risk-based strategies for detection and characterization of antibodies against biotechnology products.
Eugen Koren et al